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Brachionus sp. dans un amas de
micro algues Fixé au
Lactocuprique et monté à la
glycérine
depuis 24 mois. Eclairage Rheinberg, centre noir,
périphérie vert
clair.
L'éclairage fait ressortir les trophi du mastax et l'architecture de
la coque. |
En raison du souci réel
concernant les risques sanitaires que provoquent les
produits chimiques utilisés dans les laboratoires de microscopie,
j’ai présenté
et discuté dans une série d'articles de Micscape
(voir ci-dessous) 20 milieux
sûrs de montage. Je présente ici un sommaire critique des
faits les plus
importants, plus de 20 mois après la première utilisation
de la plupart d'entre
eux. Ces 20 formules fournissent des milieux de montage pour tous les
matériaux susceptibles de vous intéresser.
Vous n'avez pas besoin, même pour un
moyen terme (5, 10, 20
ans ?), d’avoir recourt au Baume du Canada, très cher. Et rappelez vous cela,
même si ce milieu peut n’être pas excessivement dangereux
parce que vous l’employez
seulement en quelques occasions, et surtout en petites
quantités, le
vrai danger est dans
les solvants (Toluol, Xylol,
tous toxiques et inflammables) et les
éclaircissants, (comme le carbol-xylol, avec acide
phénique) que vous devez
stocker et employer une fois acquis.
Tous les milieux ici
passés en revue n'ont besoin d'aucun de ces
solvants et présentent avec trois avantages :
1) ils sont sûrs,
2) ils sont
bon marché,
3)
ils ne soumettent pas les matériaux montés aux
déformations produites par la
déshydratation lourde des matériaux dont le baume a
besoin.
Laissez
le Baume de Canada pour les taxinomistes professionnels qui cherchent
légitimement les « CAP », (cent ans de
permanence) pour une préparation
d'espèce type, et ayez plusieurs moments d'amusement en faisant
votre
collection de préparations avec une présentation vraiment
professionnelle.
Liste de milieux expérimentaux de
montage, et l'article dans lequel la
formule peut être consultée
Pour la plupart des milieux je vous
renvoie à la formule et aux
illustrations incluses dans les articles de MICSCAPE (ils sont à quelques clicks
de distance et ne nécessitent pas de connaissance de l’anglais). Ceci préserve
beaucoup d'espace que je pourrais employer pour présenter des
images de mise à
jour des mêmes préparations revisitées plus de 20
mois plus tard. La seule
présentation plus longue est pour les milieux de montage que je
recommande, ou
qui ont besoin d'une nouvelle discussion, comme le PVA-L. Les autres
sont
commentés par des groupes d'affinités.
Aw, l'eau
antiseptique : c'est un simple montage humide, mais avec adition d'une petite quantité de fixateur ce qui rend ce montage antiseptique (Partie 1)
Indiqué quand vous
voulez examiner et préserver pour un examen postérieur au
microscope vos collections de micro invertébrés et de
micro algues, mélangées
(ou pas) aux détritus très fin.
Vous concentrez
simplement par filtration, ou mieux par décantation, votre
échantillon préservé (utilisant GALA ou Lactocuprique) et montez
les gouttes du
sédiment sur vos porte objets. Vous pouvez ajouter à
l'échantillon quelques
colorants pour teinter les individus et pour les rendre plus
évidents
(colorants FD&C, bleu de méthylène, violet de
gentiane, tartrazine,
selon
l’échantillon).
Éliminez toute
l'eau excédante des marges de la lamelle et scellez-la
très
soigneusement pour éviter l'évaporation du milieu.
Essayez d'obtenir une
préparation très mince. Normalement c'est un montage
provisoire prévu pour une durée
de plusieurs semaines ou quelque mois au plus.
Mais
parce qu’il permet la prise facile
de photos et parce que l'élasticité de la lamelle laisse
déplacer et tourner
les individus observés en appliquant des pressions
légères avec une aiguille emmanchée,
il est l'une des techniques les plus utiles que l'amateur doit
maîtriser.
Comme vous voyez c'est
seulement un raffinement, mais très utile, de la
méthode de montage humide.
Beaucoup des avantages de
cette technique sont partagés par le Glycérol, le Fructose ou le PVA-G (voir ci-dessous) employant
dans ce cas une
technique étape
par étape pour éviter l’excès de pression
osmotique que ces produits peuvent
exercer sur les micro invertébrés, tous très
labiles.
De la même manière,
même bien scellées, la durée de ces
préparations est de
seulement deux ou trois mois. Ceci parce que il n’y a ici aucun témoignage de durée supérieure.
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1.- Un Monostyla closterocerca (par la
forme du pied) entremêlé dans le détritus, on voit
le
mastax.
2.- une spore, probablement d'Althernaria, une moisissure pathogène ...
3.- deux euglènes, on voit
un gros
grain de paramylon, dans l'une d'elles, et les chloroplastes bien
conservés dans les deux cellules.
4.- une vue avec l'objectif x
40 du brachionus de la première photo, on voit clairement
les cils de la couronne.
5.- Une arcelle (peut être A.vulgaris) en coupe optique
montrant les
deux nucleus diamétralement opposés. La
thèque était déjà
transparente quand j'ai vu la préparation pour
la première
fois. Toutes les préparations sont à la glycérine.
(La photo du
Brachionus n'a pas été découpée elle peut servir d'échelle) |
GP,
glycérine pure (partie 1)
La Glycérine est
un des milieux de montage difficile, mais très utile. C'est également le milieu de référence pour monter les nématodes.
Il exerce une grande pression osmotique
sur les matériaux biologiques ayant
pour résultat des individus distordus. Pour
éviter ceci il doit être
incorporé très graduellement.
Une technique des plus
utile, si vous n'êtes pas pressés par le temps, c'est
d’ajouter 5% de glycérol à l'échantillon (0.5
ml dans 9.5 ml) ou encore
moins, et de laisser l'échantillon à part pour évaporer
l'eau jusqu'à ce que seul le
glycérol (et vôtres sujets) demeure. Protégez
de la poussière bien sûr.
Vous pouvez accélérer l’évaporation en mettant votre échantillon dans une étuve à 40 ºC, comme celle décrite par Jean Legrand dans MicrOscOpieS
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1.- un rotifère
Bdelloide, comme toujours il est contracté, mais je l'ai vu
vivant: c'est Phylodina roseola. (Objectif 40 X)
2- on ne vois pas les chloroplastes, mais il semble que ce soit une Chaetophora. ( Obj 40 X )
3.- deux très petits péritriches non déterminés.( Objectif 100 X)
4, une chlorophyta, on voit le noyau dans les cellules.(
Objectif 100 X)
5- une cyanobactérie : probablement Scytonema. (Objectif 100 X) |
Deux techniques plus
compliquées sont la concentration étape
par étape, et les méthodes de remplacement des fluides de
Seinhort.
Une
description détaillée d'elles peut être trouvée
dans l'article: NOUVEAUX
FIXATEURS SANS FORMOL (1ére partie) du Magazine
MicrOscOpieS. dans les
paragraphes dédies au montage des sujets fixés au GALA. Avec des matériaux
correctement fixés la GP garanti un aspect presque
réaliste des sujets.

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deux
diatomées à l'extrémité de sa fixation muqueuse.
Obj. x
40 |
une
cyanobacterie, probablement Gloeocapsa
. Chaque amas cellulaire est enveloppé dans un amas
gélatineux. Obj. x 100
|
une
autre algue, à cellules indépendantes, chacune enveloppée
de
gelée.
Obj. x 100 |
Les photos jointes
montrent des algues et quelques invertébrés montés
à la glycérine.
Le lutage de la lamelle doit être très soigneux. Il
existe toujours le risque
d’une filtration. Ma préparation après 24 mois a un vide
de presque ¼ de la
surface de la lamelle. Évidement mon lutage n’était pas
parfait
et les
matériaux
n’étaient pas dans la glycérine pure. L’eau c’est
évaporée. Mais le reste de la
préparation a fourni de magnifiques exemples du travail conjoint du
lactocuprique
et de la glycérine.
MMF,
milieux de montage au fructose (partie 2)
Pur, le fructose peut
être trouvé en poudre au rayon des édulcorants des supermarchés. (Si vous achetez
un flacon (500 g -1 kg), donnez-en à vos collègues, il y en aura suffisamment pour des dizaines d'entre eux et pour longtemps.
Celui ci peut être
préparé d'après la formule de Larry Leggs (Voir
son article
de MICSCAPE).

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épiderme
d'oignon, coloré au violet de gentiane.
Fond Clair. obj. x 40. Karo 60%
|
muscles
d'un copépode, vus à travers les parois du corps,
illuminés avec un Rheinberg blue-orange
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Une autre source, plus
commode et bon marchée, est le sirop concentré (à
76%) de fructose de maïs pour le petit déjeuner qui se
vend dans les
Amériques sous le nome de Karo. Il doit y en avoir également dans d'autres de marque * , mais vous
devez lire les étiquettes pour être sûrs que le
sirop ne contient pas de saccharose
(le sucre commun) qui est une source potentielle de cristallisations. Karo ne se
cristallise pas,
et il est recommandé en tant que milieux de montage de référence par
de nombreux algologues. Il est également bon pour d'autres
végétaux, inclusion des
coupes (probablement pour des
mycètes
aussi) et beaucoup d'invertébrés comme de petits
insectes, entomostracés, ou acariens.
* En Europe,vous trouverez du Fructose cristallisé pur dans tous les rayons diététique des supermarchés et en pharmacie. (NDTR)

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L'articulation
de l'aile d'une mouche.
Fond clair.
Obj. x 10. Karo 60%
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Les
"branchies" dans la queue d'une larve de moustique. Fond noir, disc de
12 mm.
Obj. x
10, . Karo 60% |
Il est utilisé
comme une solution de 60% du produit commercial. Il sèche bien
sur les bords en quelques heures. Mes préparations sont minces,
sèches, les
couvre objets ne se déplacent pas, n’ont aucune cristallisation,
et même la Violet de Gentiane
est
conservé.
Le Fructose reçoit
des sujets directement de l'eau, ou de la glycérine ; si
vous conservez des matériaux dans l'alcool,
transférez-les graduellement dans l'eau.
Comme le fait la glycérine, le fructose est capable de
distordre les
matériaux très sensibles. Une technique en trois ou
quatre
étapes peut être
nécessaire.
Il reçoit et
maintient beaucoup de colorants, et préserve très bien la
chlorophylle dans les échantillons végétaux qui
ont été fixés avec le GALA ou
le Lactocuprique.
Il est des plus
facile d'employer ces milieux de montage. Le Fructose
et le PVA-G deviendront vos
milieux de référence.
CPG-pva,
colle pure commerciale, basée sur PVA
Pour les travaux manuels,
sont vendues quelques colles transparents et sirupeuses faites
de PVA *.
On peut les trouver dans les magasins de cotillon, et selon mon
expérience il
n'est pas difficile de les trouver. Le produit est transparent et a la
consistance
du miel et peut être dilué avec 30% d'eau. Quelques
matériaux choisis (vous
devez essayer) peuvent être montés dans cette colle à 70%
PVA commerciale,
directement à partir de
l'eau ou de 1/3 de glycérol dans l'eau. Les
lamelles doivent être
lutées car si elles ne le sont pas, la colle pure tend
à sécher et se détacher
du verre en quelques mois. Je n’aime pas l’indice de réfraction
de la colle
pure, la glycérine l’améliore beaucoup (voir PVA-G).
* (l'Alcool Polyvinylique, à ne pas confondre avec de l'Acétate Polyvinylique - également PVA - qui est, ce dernier, la base de la colle blanche des écoles)
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Cladocère. Fond noir.
obj. x 10 PVA-G |
Glande perigastrique. larve de moustique. COL-D1. obj. x 10 |
extrêmité caudale de la même larve. COL-D1. obj x 10 PVA-G |
| Cliquez sur ces trois images pour les agrandir. |
Vous ne connaissez pas le
poids moléculaire exact des matières premières, ni
la concentration exacte des colles. Mais vous êtes des amateurs,
et si vous
achetez un tube de 50 ml de colle pour quelques euros, comme j’ai fait,
vous
aurez du PVA pour toute votre vie
(achetez en deux si vous projetez de vivre plus
longtemps !)
Je vous encourage de rechercher
cette colle commerciale parce que le PVA pour
la microscopie est très coûteux et difficile à obtenir, et
de se dissoudre. Les colles
sont vraiment très bon marché et prêtes à l'emploi. (S’il est difficile de les
trouver en France je crois que le PVA
m-23 que vend M. Lecomte
doit
servir en
tant que solution de base à laquelle vous pouvez adjoindre du glycérol. Voir
ci dessous)

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Un
copepodite d'un copépode cyclopoide. obj. x10. Fond noir
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Le
post abdomen d'un cladocère. Fond clair. obj. x 10
trois plans optiques amalgamés avec CombineZ
Les 3 montages
dans PVA-G
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Une
petite algue coloniale. Fond clair. obj. x 100 |
PVA-G.-
Alcool polyvinylique avec du glycérol (partie 3)
Il reçoit des matériaux
pratiquement de tous les fixateurs si vous prenez
soin de très bien les laver . Il est clair, transparent, a un
indice de
réfraction très bon, bonne capacité
éclaircissante, bon comportement au
séchage, et dure beaucoup même s’il n’est pas
lutéé.
Il reçoit et
maintient la couleur des colorants les plus habituels que
l'amateur peut employer, et également la chlorophylle des
végétaux. Et vous
pouvez monter avec lui pratiquement tout, y compris le pollen (avec ou
sans
colorations supplémentaires). Je suis fanatique de PVA-G et
recommande qu'il devienne
votre milieu de montage habituel.

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un
acarien - "araignée rouge" de l'Hibiscus
fond noir, disc de 12 mm. obj x 10. PVA-G
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un
détail de la tête du même. Fond clair.
obj. x 40
PVA-G |
Ce
montage a seulement 6 mois. Il est utilisé ici pou
montrer la versatilité du PVA-G
|
Pour ces
matériaux difficiles comme les échantillons
mélangés avec détritus,
dont nous avons parlé dans le paragraphe sur la GP, une
méthode étape par
étape peut être pratiquée aussi avec le PVA-G
avec de
très bons
résultats.
Ceci vous donne une préparation avec l'aspect (ou meilleur)
d'un montage au
glycérol, mais solide, sec, et susceptible d'être
archivé facilement et examiné
même à l'immersion àd'huile sans problème. J'
utilise un produit de marque "ITOYA" Paper Glue (Voir leur site en anglais sur le Net)

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Épiderme
d'Aptenia cordiflora - 24
mois après
- obj. x 100- fond clair. PVA-G |
Pollen
de Pétunia grandiflora.
Fast
Green FCF- fond clair.
obj. x 100- PVA-G - Ce montage a 18 mois.
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Note :
après que l'article dans Micscape ait été
publié j’ai visité le site
de Marcel Lecomte, et
les produits qu'il vend. Si vous ne trouvez pas la colle
bon marché de PVA (ou si vous voulez une référence
plus technique, avec un
matériel bien étalonné) je pense que la formule
peut être préparée avec cette
formulation :
Alcool polyvinylique (m 23a)...........30 ml
De l'eau saturée avec du
borax.......12 ml
Glycérine................................................18
ml
Ceci inclut un produit
polyvinylique qui a déjà 1% du phénol en tant que
conservateur. C’est un avantage.
PVA-L.-
Alcool polyvinylique avec de l'acide lactique. (partie 2)
Il est proposé comme le produit de remplacement pour la formulation du Hoyer.
Le Hoyer est un éclaircissant puissant avec de la gomme arabique, hydrate de chloral et acide phénique, tous les deux interdits. L’acide lactique est très pénétrant et la formule était prometteuse, jusqu'à la connaissance de son Indice de Réfraction qui est de 1.43, bien plus bas que celui de la glycérine (1.47) Réellement le PVA-L est un bon éclaircissant qui agit vite, mais le PVA-G, en le laissant agir, doit être plus éclaircissant, pour les mêmes matériaux. Bien sûr, les préparations qui j’ai, avec PVA-L, son sèches, fixes, et claires, excessivement éclaircissantes avec certains matériaux comme des aphides, par exemple. Mais quelques unes d'entre elles ont un problème supplémentaire dont je ne connais pas l'origine, elles ont de petits cristaux parsemés sous le couvre objet.
Il n’y a aucun raison, que je puise découvrir qui justifie ce fait et je crois simplement qu'on a besoin d'être très soigné quand on lave les lames, les lamelles et aussi dans l'emploi des fixateurs ou autres réactifs ajoutés aux sujets.
Pour le moment je dois recommander l’utilisation du PVA-G, et continuer quelques expériences avec le PVA-L.
Voici deux exemples réussis de montage au PVA-L
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Photo d'un petit "thrip" (un insecte de l'ordre des Thysanoptera) capturé sur une fleur de Gerbera jamesoni. Il fut fixé à l'alcool 70%, lavé a l'eau et monté au PVA-L, il y a 8 mois. La préparation est parfaitement sèche, fixe et claire, sans cristallisations. Regardez les ailes si particulières de cet insecte. Obj. x 10. éclairage avec le Col-D3. 6 photos furent composées pour cette image. Le fond fut estompé avec Photo Paint |
Cliquez sur la photo pour l'agrandir! |
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NPM.-
Vernis à ongles (partie 2)
Il y a un long temps que
le vernis à ongles est
utilisé comme "scellant" pour
les lamelles. Mais il peut également être
employé en tant que milieu
résineux synthétique. Il est le plus cher des milieux étudiés ici.
Mais c'est certainement le plus facile à trouver.
Le dissolvant commun pour
tous les vernis à ongles est l’acétone ou
l’acétate
butylique, ou beaucoup d’autres mélanges commerciaux.

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Actinophrys
sol - un héliozoaire, fixé avec AFA, coloré avec
FastGreen FCF, les
actinopodes sont rétractés. Obj. x 40. NPM |
Extrémité
de l'aile d'un moustique.
Obj. x 10. NPM |
Généralement,
pour l'employer comme milieux de montage, il est bon de le
diluer avec un peu son solvant pour s’assurer qu’il s'étale
bien sous la
lamelle.
Les matériaux
à monter très délicats doivent être
complètement
déshydratés par quelques
passages à l'alcool (30, 50, 75, 96, et 96 une deuxième fois,
pourrai être une série appropriée)
On peut
inclure dans le NPM à partir de l’alcool de 96%. Après
plus de 20 mois, les préparations que j'ai
faites
montrent qu’elles ne se rétractent pas, qu'elles sont possibles en épaisseur
très mince, et ce qui est le plus important, qu'elles préservent les
colorations appliquées aux
sujets montés.
J'ai monté des
épidermes de feuilles, des poils, des écailles de
papillon,
des parties d'insectes, des algues, des protozoaires et des
rotifères. Les plus
mauvaises furent les branches cylindriques des algues filamenteuses,
qui ont
été aplaties par la déshydratation avec l'alcool.

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Surface
supérieure de l'aile de moustique.
Obj. x 40 |
L'articulation
de la patte d'un moustique .
Obj. x 40 |
Les plus difficiles sont les
préparations épaisses, parce qu'on doit replacer
continuellement le vernis que se rétracte par les bords,
jusqu'à consolidation totale du matériel. On doit
mettre des cales pour éviter
d'écraser les sujets.
La durée du
montage dépend peut être de la qualité du Vernis.
Un microscopiste
que l’a utilisé me rapporte que ses
préparations,
au contraire des miennes se détachent (s'épluchent) du verre en quelques mois.
Peut être que
les porte objets et les couvre objets doivent être soigneusement
dégraissés ? J’ai utilisé le
vernis transparent de la marque Revlon. Je considère qu'une bonne
précaution est de sceller
la lamelle avec un mastic acrylique.
Gomme
Damar (Dammar).- Partie 2
Étant une
résine naturelle d'origine végétal le Damar
partage avec le Baume la longue
durée.
C’est presque un CAP. Les solvants normaux sont le toluène
et le xylène,
qui sont les bandits de l’histoire. Mais contrairement au Baume il est
soluble dans
la térébenthine,
ou même l’alcool d' isopropyle.
Les deux formulations rendent
ce produit moins dangereux et il est certainement beaucoup plus bon
marché que
le baume.
Achetez-le avec ses
solvants dans les magasins d’art, ou il est vendu
pour faire des vernis pour peintures à l’huile.

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Gomme
Damar- aile de mouche, obj. x 10
Fond Clair |
Gomme
Damar - surface de l'aile d'une mouche. Obj x 40 Fond Clair |
Néanmoins il n’est
pas complètement sûr, parce que pour faire une bonne
dissolution on doit chauffer la résine pour la fondre, et alors
(hors du feu)
on doit ajouter lentement le solvant. Il est bon de la
préparer diluée et de la laisser se concentrer jusqu'à la densité
voulue.
Il exige une
déshydratation très graduelle et complète avant le
montage, mais
seulement à 96%, comme le vernis à ongles, on n’a pas besoin d’employer
l' alcool absolu.
C’est naturellement un
très bon choix, mais seulement pour l’amateur adulte. Un protozoologiste dit que c'est le meilleur milieu pour
monter des grégarines.
Gelée
De Glycérine de Kaiser.- Partie 4
C'est la meilleure
formule des milieux du groupe des gelées de
glycérine., même si vous y 'ajoutez le double de son volume d'eau.
J'ai discutté de cette formule dans un message du Forum..... C'est même une
formule historique venant du 19ème siècle, et
certainement c'est le milieu
le plus souvent proposé aux amateurs.

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La
chambre incubatrice d'une Daphnie
(la même que dans le précédant article
) |
Un des
embryons de la photo précédante. |
Mais vous devez la faire fondre
dans un appareil approprié, et même avec un
certain risque si vous employez le gaz ou l'alcool, les flammes nues,
les
allumettes ou les allume cigarettes. Vous devez la filtrer fréquemment pour
avoir un milieu vraiment clair et propre, et lutter contre les bulles
d'air, grandes,
petites, et microscopiques, toujours pressentes sous la lamelle en
priant
quelles ne restent pas collés à, ou même sur, votre
sujet. Au plus elle est
thermiquement instable, tout au moins dans les pays chauds, ayant besoin
d’un soin
spécial pour la stocker ou pour stocker les
préparations
faites avec elle. Vous devez les archiver horizontalement. Pour
différentes raisons je la trouve aussi
criticable que le
baume . (Oui, je le sait : c’est une
hérésie !)
La
Gelée au Borax de Fisher est la plus difficile, bien
qu’elle soit très
recommandée (pour le pollen surtout). Même avec double
borax et beaucoup d’antiseptique
cette formule devient facilement polluée par des
champignons et des bactéries. Je ne l'utilise pas.
Rappelez-vous que pour
faire une très bonne inclusion dans les
gelées il
vaut mieux préalablement imprègner vos sujets de
glycérine.
(Si vous avez les équipements requis, (ou
vous ne pouvez pas obtenir PVA), utilisez
les gelées, mais probablement vous devrez fabriquer votre
appareil. Si vous
êtes enthousiaste des gelées, essayez de construire le
four de Jean Legrand ou
la platine chauffant de Jean
Marie Cavanihac, tous les deux sont adaptés pour vous permettre une
manipulation complète de votre sujet dans les milieux fondus
avant d'appliquer
la lamelle. Oubliez d'être pressé pour éviter les brûlures)
Les gens disent que les gelées sont les milieux
d'élection pour monter le
pollen. Mais essayez d'employer du PVA-G
(avec ou sans colorants supplémentaires) Je crois que la
gelée de glycérine
n’est pas meilleur.
Sirop de von Apathy.- est un sirop
populaire de gomme arabique avec du saccharose
(le sucre commun).
C'est
une formulation très ancienne
( fin du 19ème siècle) de von Apathy
. On dit que ces très difficile de dissoudre la gomme
arabique, et
on recommande toujours la gomme en larmes, et non la gomme en poudre.
Ce fut
vrai avant mon invention du « truc du sucre ».
Mélangez soigneusement le
sucre et la gomme arabique en poudre. Et ajoutez l’eau petit à
petit. Le sucre
et la gomme sont dissous en même temps et vous avez votre
solution en 5 minutes.
L’Apathy
a été
toujours blâmé à cause de la cristallisation du saccharose.
Dans
les préparations très minces des tissus colorées
au Soudan, pour la
mise en évidence des lipides que j’ai effecyuées comme
élève dans mon université il
y a beaucoup d'années, je n’ai jamais vu les cristaux.
Maintenant je crois qu'ils deviont utiliser la formule modifiée d' après Lillie avec fructose.

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Après
24 mois, l'antenne d'un copépode
Obj. x 40 Fond Clair |
Cristaux
de saccharose à la marge de la lamelle
Lumière polarisée
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Mais après 24 mois
toutes les préparations que j'ai effectuées avec ce
sirop
montrent des cristallisations qui naissent
depuis le bord de la lamelle vers le centre du couvre objet,
même si elle est
scellée avec du vernis à ongles.
Comme la cristallisation
est beaucoup plus
importante avec les lamelles non scellée,qu' avec les autres, je pense qu'un très bon mastic
, appliqué soigneusement,
peut éviter le problème.
La formule ne sèche pas rapidement,
mais elle sèche. Les sujets inclus son bien conservés.
Le seul problème est la formation de cristaux.
GAF -
Gomme arabique avec du fructose. (partie 3c)
J'ai constaté
que le GAF, qui contient du fructose (j’utilise le Karo),
ne souffre pas du
problème de la cristallisation. Le GAF
c’est ma
formule de replacement du milieu de Lillie,
dérivé de
l’Apathy contenant du fructose en lieu du saccharose. Les résultats sont
comparables au PVA-G,
même avec les fragiles protozoaires. Mais le séchage des
bords est bien plus lent
et sous des climats humides il pourrait exiger l’aide d'un four. Mais il
sèche quand même.

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Articulation
de l'aile d'une mouche,
GAF, obj x 10- Fond Clair |
Cellules vues
à travers la chitine du dos d'un copépode, GAF, obj x 40 Fond Clair
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Il reste deux
problèmes sérieux que je rencontre avec le GAF. D'abord il a besoin d'un antiseptique pour le préserver des
infections fongiques
(j'ai employé la Listerine à 10%),
et ensuite, dans une partie de mes
montages de
Cladocères avec des embryons
il y a une diffusion d’huiles dans le milieu, ruinant l'aspect de la
préparation. Je
pense que cela peut s'éviter en passant les matériaux
chargés de lipides dans
un bain alcoolique, et de nouveau à l'eau avant de les monter

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Branchies
d'un moustique, éclairage avec un Rheinberg à quadrants rouges et
bleus.
Obj. x 10-GAF |
Eclairage
Oblique de l'antenne d'un copépode, obj. x 40 -GAF
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Mais, avant que vous vous
engagiez dans la préparation et l’emploi du GAF vous
devez vous rappeler que les résultats sont très
semblables mais pas supérieurs au montage en fructose
ou en PVA-G. Si vous trouvez du Karo ou du fructose dans votre
supermarché
vous n'avez pas besoin de GAF.
C'est la même chose si vous obtenez du PVA.
Norland
61.-
Je ne suis pas un diatomologiste. Mais il
est clair pour moi que
ce sommaire doit inclure cette résine synthétique qui
à un indice de réfraction
de 1.58, la rendant utile pour
le montage des diatomées. Elle
est vendue pour
réparer les pare brises "criqués" de voiture.
Probablement les résines de cyanoacrylate
qui doivent être traitées aux UV (la lumière indirecte
intense du soleil est une
bonne source d' UV) pourraient avoir plus ou moins le même indice.
Je ne les ai
jamais utilisées mais ellessont très recommandée par des
amateurs sérieux.
J'en ai discutté dans les articles de Micscape
(parties 3 et 4) :
AG,
glycérol alcoolique
FG,
milieu de glycérol et fructose
FGL,
glycérol, lactique et fructose
GLG, gomme arabique, acide
lactique et glycérine
GG, Gomme glycérinée
FJ, Fructose
gelée
Ils ont un bon comportement et sont utiles
pour le travail à court terme.
Mais ils ne durcissent pas bien, ils ont besoin d’être
très soigneusement scellés ,
et ne sont en aucun cas meilleurs que ceux évoqués
ci-dessus.
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RÉSUMÉ
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Ainsi,
vous avez un milieu utile et nécessaire, mais provisoire
-
Aw.
Quatre milieux
d'élection pour l'amateur moyen
- FMM (solution de fructose faite
maison) ou
mieux
-
Sirop
commercial de Fructose de type Karo,
-
PVA-G
- NPM
-
Gelée de Kaiser
Un milieu pour adultes :
-
Gomme
Damar.
Nous avons aussi un milieu spécial pour les diatomologistes
:
- Norland 61,
Trois
bons milieux alternatifs
- PVA-L, (pour le moment on peut considérer que ses résultats sont
similaires à ceux obtenus au PVA-G)
- PG : difficile à sceller; pour certain sujets il est similaire au PVA-G),
(pour le moment peut
être
indispensable pour les nématodes, on doit le comparer au PVA-G ou au PVA-L)
- GAF, à la gomme arabique, de résultat
similaire au sirop de fructose mais un peu plus difficile à préparer.
NOTES :
J'ai préparé la plupart des milieux étudiés
il y a plus de vingt mois. J’ai
employé une solution à 10% de Listerine
, c'est mon antiseptique préféré, pour les
gelées et les milieux à la gomme arabique. Aucune des formules
traitées à la Listerine n’a
développé d' infections
fongiques sauf la gelée de Fischer, qui l'a
fait après qu'elle ait fondu pendant les chaleurs de l'été.
Si vous voulez un antiseptique
plus traditionnel, et si vous pouvez l'obtenir,
employez du phénol (interdite
et dangereuse) à une
concentration de 1%.
J'ai
laissé la moitié de la formule
de von
Apathy avec saccharose, et moitié de la Gelée de Fisher
avec double borax, sans
ajouter de Listerine à l'un ou l'autre. Les deux sont maintenant
fortement
souillés. Et je vous assure que l'odeur du Von Apathy n'est pas
bonne.
REFERENCES :